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epicypher產(chǎn)品
產(chǎn)品時(shí)間:2022-11-28
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CUTANATM ChIC/Cut & Run Kit 895.00 SKU: 14-1048包裝: 48個(gè)反應(yīng)

CUTANATM ChIC/CUT & RUN 試劑盒能夠簡(jiǎn)化組蛋白翻譯后修飾(PTM)和染色質(zhì)相關(guān)蛋白的染色質(zhì)分析,同時(shí)通過(guò)多通道移液提供增加的吞吐量和可重復(fù)性

包括陽(yáng)性(H3K4me3)和陰性(IgG)對(duì)照抗體與 SNAP-CUTANATM 加入對(duì)照配對(duì)以進(jìn)行測(cè)定優(yōu)化和連續(xù)監(jiān)測(cè)(2)。包括用于數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化的大腸桿菌 DNA。該試劑盒適用于各種輸入,包括來(lái)自天然、低溫保存或交聯(lián)樣品的細(xì)胞或細(xì)胞核。雖然建議從500,000個(gè)單元格開(kāi)始,但是只需要5000個(gè)單元格就可以生成可比較的數(shù)據(jù)。包括對(duì)照和與不同的目標(biāo)類(lèi)型,樣品輸入和低細(xì)胞數(shù)量的兼容性使這個(gè)試劑盒成為染色質(zhì)定位實(shí)驗(yàn)的選解決方案。如需大量訂購(gòu),請(qǐng)聯(lián)系

試劑盒內(nèi)容試劑盒包含緩沖液,酶,磁珠,對(duì)照抗體,穗對(duì)照,8條管,和自旋柱必要的準(zhǔn)備和純化 CUT & RUN DNA 從細(xì)胞或細(xì)胞核開(kāi)始。有關(guān)協(xié)議所需的其他材料和設(shè)備,請(qǐng)參閱工具包手冊(cè)。儲(chǔ)存和穩(wěn)定性立即打開(kāi)試劑盒,并在室溫,4 °C  -20 °C 下儲(chǔ)存組件,如所示(見(jiàn)試劑盒手冊(cè)的完整說(shuō)明)。自收貨之日起6個(gè)月內(nèi)保持穩(wěn)定。完整說(shuō)明請(qǐng)參閱工具包手冊(cè)。

Catalog No 14-1048

Lot No 22003004-81

包裝尺寸48反應(yīng)

產(chǎn)品描述: CUTANATM ChIC/CUT & RUN 試劑盒能夠?qū)M蛋白翻譯后修飾(PTMs)和染色質(zhì)相關(guān)蛋白進(jìn)行流線(xiàn)型染色質(zhì)分析,同時(shí)通過(guò)多通道移液提高通量和重復(fù)性。包括陽(yáng)性(H3K4me3)和陰性(IgG)對(duì)照抗體與 SNAP-CUTANATM 尖峰對(duì)照配對(duì)用于測(cè)定優(yōu)化和連續(xù)監(jiān)測(cè)(2)。包括大腸桿菌 DNA 用于數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化。該試劑盒適用于各種輸入,包括來(lái)自天然、低溫保存或交聯(lián)樣品的細(xì)胞或細(xì)胞核。雖然建議從500,000個(gè)單元格開(kāi)始,但可比數(shù)據(jù)只需要5000個(gè)單元格即可生成。對(duì)照的包含,以及與不同的目標(biāo)類(lèi)型,樣品輸入和低細(xì)胞數(shù)量的兼容性,使得這個(gè)試劑盒成為染色質(zhì)定位實(shí)驗(yàn)的選解決方案。

試劑盒內(nèi)容試劑盒含有緩沖液,酶,磁珠,對(duì)照抗體,穗在對(duì)照,8條管,和紡錘體必要的制備和純化 CUT & RUN DNA 從細(xì)胞或細(xì)胞核開(kāi)始。有關(guān)所需的其他材料和設(shè)備,請(qǐng)參閱與套件版本3相對(duì)應(yīng)的用戶(hù)手冊(cè)。

儲(chǔ)存和穩(wěn)定性: 立即打開(kāi)試劑盒,并按照指示在室溫,4 °C  -20 °C 下儲(chǔ)存組件(參見(jiàn)與試劑盒版本3相對(duì)應(yīng)的用戶(hù)手冊(cè))。自收貨之日起6個(gè)月內(nèi)保持穩(wěn)定。

使用說(shuō)明: 請(qǐng)參閱與工具包版本3對(duì)應(yīng)的用戶(hù)手冊(cè)。此工具包與以前的用戶(hù)手冊(cè)不兼容。

1: CUT & RUN DNA 片段大小分布分析。使用 CUTANATM ChIC/CUT & RUNK 500,000個(gè) K-562細(xì)胞開(kāi)始進(jìn)行 CUT & RUN。使用從 IgG (13-0042k) H3K4me3(13-0041k)試劑盒對(duì)照抗體分離的 CUT & RUN DNA 制備配對(duì)末端 Illumina 測(cè)序文庫(kù)。文庫(kù) DNA 采用安捷倫錄音分析法進(jìn)行分析。該分析證實(shí)單核小體在 CUT & RUN 中主要富集(? 300bp 峰代表150bp 核小體 + 測(cè)序銜接子)

2: SNAP-CUTANATM K-MetStat Spike-in 控件。代表16種不同的 K- 甲基 PTM 狀態(tài): H3K4,H3K9,H3K27,H3K36 H4K20處的單甲基化,二甲基化和三甲基化的 DNA 條形碼設(shè)計(jì)核小體(dNucs)以及未修飾的對(duì)照,在添加用試劑盒提供的對(duì)照抗體(IgGH3K4me3)之前加入 CUT & RUN 樣品。使用加入產(chǎn)品頁(yè)面上提供的 shell 腳本和分析 excel 表,從 rawfastq 文件中計(jì)數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)化每個(gè)加入條形碼的實(shí)例,顯示了 IgG (頂部,標(biāo)準(zhǔn)化為總讀數(shù)的總和) H3K4me3(底部,標(biāo)準(zhǔn)化為目標(biāo))抗體與該試劑盒一起提供。刺激因子證實(shí)了最佳的實(shí)驗(yàn)條件(H3K4me3抗體特異性地回收了目標(biāo) dNuc,而 IgG 沒(méi)有顯示出優(yōu)先富集)

3: CUT & RUN 全基因組熱圖。使用具有500,000個(gè) K-562細(xì)胞的 CUTANATM ChIC/CUT & RUN 試劑盒生成 CUT & RUN 數(shù)據(jù)。在熱圖中顯示了 IgG () H3K4me3()試劑盒對(duì)照抗體的兩個(gè)重復(fù)(“ Rep")。對(duì)于18,793個(gè)基因,提供了與轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)(TSS,+/-2kb)對(duì)齊的 CUT & RUN 信號(hào)(來(lái)自9-2500萬(wàn)個(gè)配對(duì)末端讀數(shù))。高信號(hào)和低信號(hào)按照強(qiáng)度排序(從上到下,并分別用紅色和藍(lán)色反射。每個(gè)熱圖中的基因行相對(duì)于 H3K4me3 Rep 1從高信號(hào)到低信號(hào)進(jìn)行排序,證明了試劑盒工作流程的可重復(fù)性。

4: 代表性的基因?yàn)g覽器軌跡。CUT & RUN 數(shù)據(jù)生成如圖3所示。對(duì)于 IgG  H3K4me3試劑盒對(duì)照抗體的兩個(gè)重復(fù)(“ Rep") ,在 TRMT2A 基因上顯示了一個(gè)代表性的161kbwindowH3K27me3(AbClonal A16199)和轉(zhuǎn)錄因子 CTCF (EpiCypher 13-2014)的抗體也顯示了代表性的蹤跡。CUT & RUN 試劑盒為每個(gè)目標(biāo)產(chǎn)生了預(yù)期的基因組分布。使用 Integrative GenomicsViewer (IGV,Broad Institute)生成圖像。

使用核酸酶(CUT & RUN)進(jìn)行目標(biāo)下切割和釋放是由 Steven Henikoff1博士小組開(kāi)發(fā)的一種革命性的基因組定位策略。它從 Ulrich Laemmli2博士構(gòu)建染色質(zhì)免疫切割(ChIC) ,其中蛋白 A 與微球菌核酸酶(pA-MNase)的融合被募集到原位選擇性切割抗體結(jié)合的染色質(zhì)3。在 CUT & RUN 中,細(xì)胞或細(xì)胞核被固定在固體支持物上,從溶液中分離出 pAG-MNase 切割的 DNA 片段。該工作流程與下一代測(cè)序(NGS)兼容,以提供組蛋白翻譯后修飾(PTM)和染色質(zhì)相關(guān)蛋白(例如 TFs 和染色質(zhì)重塑者1)的高質(zhì)量全基因組概況。

從歷看,ChIP-seq 是組蛋白 PTM 和染色質(zhì)相關(guān)蛋白全基因組定位的主要方法。在這種方法中,大量染色質(zhì)被超聲波或酶消化破碎。然后免疫沉淀靶標(biāo)特異性片段。盡管有廣泛的優(yōu)化和嚴(yán)格的洗滌條件,ChIP-seq 需要大量的細(xì)胞(通常是105-106個(gè)細(xì)胞)和輸入染色質(zhì)和免疫沉淀物質(zhì)(通常每個(gè) > 3000萬(wàn)讀數(shù))的深度測(cè)序來(lái)解析來(lái)自背景的信號(hào)。 ChIC  CUT & RUN 通過(guò)使基因組片段靶向釋放到溶液中來(lái)革命性地研究染色質(zhì)調(diào)節(jié)。通過(guò)這種創(chuàng)新,背景顯著減少,允許使用少量細(xì)胞和每個(gè)反應(yīng)只有300-800萬(wàn)測(cè)序讀數(shù)的組蛋白 PTM 和染色質(zhì)相關(guān)蛋白的高分辨率基因組作圖(2)。精簡(jiǎn)的工作流程和節(jié)省的成本使得 ChIC/CUT & RUN 適合更大的實(shí)驗(yàn)吞吐量,允許更深入和更快速的調(diào)查發(fā)現(xiàn)表觀(guān)遺傳生物學(xué)。

2代表性的基因組瀏覽器軌跡顯示了使用500,000個(gè) K562細(xì)胞的 CUTANATM CUT & RUN 結(jié)果。對(duì)于各種表觀(guān)遺傳靶標(biāo),包括組蛋白 PTM (H3K4me3,H3K27me3H3K27ac) ,轉(zhuǎn)錄因子(CTCF) ,表觀(guān)遺傳閱讀蛋白(BRD4) ,使用每個(gè)反應(yīng)的300-800萬(wàn)個(gè)測(cè)序讀數(shù)觀(guān)察到具有預(yù)期分布特征的清晰峰,編寫(xiě)酶(MLL1)和染色質(zhì)重塑劑(SMARCA4)。兔 IgG 抗體顯示為陰性對(duì)照(上圖)[0-301][0-301][0-418][0-926][0-180][0-332][0-95] IgGH3K4me3H3K27me3H3K27acCTCFBRD4MLLSMARCA4Fig 2TAL1 STIL CMPK1 LINC01389 FOXD2背景和描述7CUTANATM ChIC/CUT & RUN 試劑盒包含用于48種反應(yīng)的材料,設(shè)計(jì)用于多通道移液,以實(shí)現(xiàn) CUT & RUN 增加的吞吐量?jī)?yōu)勢(shì)。該試劑盒包括陽(yáng)性(H3K4me3)和陰性( IgG)對(duì)照抗體以及 SNAP-CUTANATM K-MetStat 小組(攜帶廣泛研究的賴(lài)氨酸甲基化 PTM 16個(gè) DNA 條形碼設(shè)計(jì)者核小體)的等分試樣。K-MetStat 面板被加入到控制反應(yīng)中,直接監(jiān)控實(shí)驗(yàn)的成功并幫助故障排除。此外,剪切的大腸桿菌 DNA 被加入到 pAG-MNase 切割后的所有反應(yīng)中,以控制文庫(kù)的制備并使 NGS 標(biāo)準(zhǔn)化成為可能。該試劑盒與細(xì)胞和細(xì)胞核兼容,包括低溫保存和交聯(lián)樣品(3)。雖然建議從500,000個(gè)單元格開(kāi)始,但是只需要5,000個(gè)單元格就可以產(chǎn)生可比較的數(shù)據(jù)(4)。包括嚴(yán)格的控制,以及與不同的目標(biāo)類(lèi)型,樣本輸入和細(xì)胞數(shù)量的兼容性使試劑盒理想的各種研究應(yīng)用。

3H3K4me3富集區(qū)域側(cè)翼注釋轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)(TSS,+/-2kb) CUT & RUN 信號(hào)(紅色)和背景(藍(lán)色)的熱圖?;蛐性谡麄€(gè)條件下排列,表明樣品類(lèi)型保留了全基因組富集模式。

北京華新康信也有Epicypher實(shí)驗(yàn)試劑銷(xiāo)售,下面給大家講講Epicypher服務(wù)以及實(shí)驗(yàn)樣本;Moltox ForteBio Moltox ForteBio Moltox ForteBio Moltox ForteBio Moltox ForteBio  Toxin toxin toxin toxin toxin toxin toxin toxin toxin toxin toxin toxin toxin toxin  Epicypher實(shí)驗(yàn)  Epicypher試劑 Epicypher說(shuō)明  Epicypher試劑方案Epicypher實(shí)驗(yàn)說(shuō)明  Epicypher說(shuō)明書(shū) Epicypher技術(shù)參數(shù) Epicypher方案對(duì)比  Epicypher優(yōu)勢(shì)介紹  Epicypher廣州試劑 Epicypher深圳試劑Epicypher說(shuō)明書(shū) Epicypher技術(shù)參數(shù)Epicypher實(shí)驗(yàn)方案Epicypher技術(shù)對(duì)比Epicypher購(gòu)買(mǎi)說(shuō)明 Epicypher天津試劑 Epicypher北京試劑Epicypher廈門(mén)試劑Epicypher大理試劑Epicypher武漢試劑Epicypher福建試劑Epicypher安徽試劑Epicypher廣西試劑Epicypher廈門(mén)試劑Epicypher常州試劑Epicypher安徽試劑Epicypher長(zhǎng)沙試劑Epicypher哈爾濱試劑Epicypher沈陽(yáng)試劑Epicypher深圳試劑Epicypher武昌試劑Epicypher湖北試劑Epicypher湖南試劑Epicypher上海試劑Epicypher ForteBio實(shí)驗(yàn)試劑,moltox實(shí)驗(yàn)試劑,toxin實(shí)驗(yàn)試劑,ForteBio  moltox  toxin 各種試劑的實(shí)驗(yàn)參數(shù),說(shuō)明書(shū),歡迎咨詢(xún)  Epicypher試劑介紹  Epicypher試劑介紹  Epicypher研究方案

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